赭曲霉毒素A(OTA)作為曲霉屬和青霉屬真菌產(chǎn)生的強毒性代謝物,廣泛存在于谷物、飼料、酒類及中藥材中,其致癌、致畸及肝腎毒性對人類健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。在此背景下,
赭曲霉毒素A免疫親和柱(OTA-IAC)憑借其高特異性、高靈敏度的凈化能力,成為食品安全檢測領(lǐng)域的關(guān)鍵工具。

1.技術(shù)原理:抗原抗體反應(yīng)的精準(zhǔn)捕獲
赭曲霉毒素A免疫親和柱的核心在于將單克隆抗體交聯(lián)于瓊脂糖凝膠微球或納米材料表面,形成特異性識別位點。當(dāng)含OTA的樣品提取液通過柱體時,OTA與抗體發(fā)生抗原-抗體結(jié)合,形成穩(wěn)定的復(fù)合物,而其他雜質(zhì)則隨流動相被洗脫。該技術(shù)利用免疫親和層析原理,實現(xiàn)了對OTA的靶向富集,顯著降低基質(zhì)干擾,提升后續(xù)檢測的準(zhǔn)確性。例如,在檢測谷物中OTA時,通過免疫親和柱凈化后的樣品,HPLC檢測的信噪比可提升5倍以上。
2.操作流程:標(biāo)準(zhǔn)化與高效性的結(jié)合
赭曲霉毒素A免疫親和柱的操作流程分為預(yù)處理、上樣、洗滌、洗脫四大步驟。首先,將柱體恢復(fù)至室溫并排空保存液;隨后,將10mL樣品提取液以1滴/秒的流速通過柱體,使OTA與抗體充分結(jié)合;接著,依次用真菌毒素清洗緩沖液(含氯化鈉、碳酸氫鈉及吐溫-20)和純水淋洗,去除未結(jié)合雜質(zhì);最后,用1.5mL色譜級甲醇洗脫OTA,收集洗脫液并稀釋后,可直接用于HPLC或LC-MS/MS檢測。整個過程僅需15-20分鐘,且回收率穩(wěn)定在90%-110%之間。
3.應(yīng)用場景:從田間到餐桌的全鏈條覆蓋
該產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于糧食、飼料、酒類、調(diào)味品及中藥材的檢測。例如,在檢測酒類樣品時,需先通過脫氣處理去除二氧化碳,再以提取液稀釋后上樣;而在中藥材檢測中,則需結(jié)合均質(zhì)提取和離心過濾步驟。該技術(shù)符合GB/T 23502-2009、SN/T 1746-2006等國家標(biāo)準(zhǔn),檢測限可達0.1μg/kg,滿足國際食品法典委員會(CAC)的要求。此外,它還可與ELISA試劑盒聯(lián)用,實現(xiàn)高通量篩查。
4.技術(shù)優(yōu)勢:精準(zhǔn)、高效與經(jīng)濟的平衡
相比傳統(tǒng)凈化方法,赭曲霉毒素A免疫親和柱具有三大優(yōu)勢:其一,特異性高,抗體柱容量達100ng以上,可有效排除黃曲霉毒素等其他真菌毒素的干擾;其二,操作簡便,無需復(fù)雜設(shè)備,適合基層實驗室;其三,成本低廉,單柱價格較LC-MS/MS前處理耗材降低60%以上。隨著食品安全監(jiān)管的加強,它將在全球農(nóng)產(chǎn)品貿(mào)易、臨床毒理學(xué)研究等領(lǐng)域發(fā)揮更大作用。